膜再生液
名称:膜再生液
规格:100mL
价格:144元
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产品描述:
膜再生液(Stripping buffer),也称抗体剥离液体、一抗二抗去除液,可用于转了蛋白的膜进行多次Western Blot检测。在室温条件下,将用过的硝酸纤维素膜或PVDF膜浸泡在膜再生液中,可高效剥离与膜抗原结合的一抗和二抗,且不影响与膜结合的蛋白,随后可进行其他蛋白的检测。本品可满足少量样品多次检测不同蛋白表达的需求,也可省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。
产品特点:
1. 无毒无味无害,室温保存,可按照普通化学品安全规范进行操作和处置。
2. 可对同一张膜进行10次以上的Western Blot检测,消除重新上样造成的误差,使结果更准确。
3. 使用膜再生液前,硝酸纤维素膜或PVDF膜可保存在PBS或TBS缓冲液中,也可室温干燥保存数月。干燥的PVDF膜应该先用甲醇浸泡5分钟。
使用说明:
1. 将硝酸纤维素膜或PVDF膜充分浸泡于适当体积的膜再生液中,在摇床上室温孵育15~30分钟。洗脱时间应根据具体实验进行优化。洗脱某些抗体需要较长的时间如30~60分钟。
2. 用自备Western Blot洗涤缓冲液振荡洗涤2~3次,每次5分钟。
3. 此时膜上抗体已去除。用脱脂奶粉或BSA封闭,进行Western Blot后续操作。
产品说明:
1. 膜再生的实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下,将与抗原分子结合的一抗和二抗洗脱下来。影响抗体从膜上洗脱下来的因素有很多,比如膜的类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合特性等。膜再生液中洗膜的时间需根据推荐时间进行调整,以达到最佳效果。
2. 确定膜上抗体是否去除:使用ECL发光液孵育再生后的膜约1分钟,然后进行蛋白显影。若显示条带,则表明抗体未完全去除,应继续将膜浸泡在膜再生液中孵育30~60分钟,然后再次使用ECL发光液检查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定最佳洗膜时间。
3. 因产品自身原因,使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA封闭的膜上的抗体更容易被Strip下来。因此准备进行Strip的膜,最好使用脱脂奶粉封闭。
4. 干燥的膜上的抗体较难被Strip干净,膜尽量避免干燥保存。
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