3D细胞培养及类器官构建支架材料 (SPB复合支架)

SPB复合支架

         SPB复合支架由天然生物材料和人工合成材料复合，是一种被覆薄层微纳米孔级结构的多相生物支架，高度模拟体内骨与软骨生长微环境，无需额外加入价格昂贵的生长因 子，具有良好的骨软骨诱导和发生能力。

技术问答：

1、问：你们这个材料是什么构成的？

      答：我们的支架是天然复合材料和人工合成材料复合构成，天然复合材料有从骨中提取的成分，加上人工的材质合成，后包被一层水凝胶制成。

2、问：现在一般的类器官培养都是不用胎牛血清，都是用大量的细胞因子培养液，因为胎牛血清是外源的，咱们这个用胎牛血清不用细胞因子，为什么咱们这个提倡用血清

     答：胎牛血清最主要是提供营养，既往2D培养的时候都是用胎牛血清的，并没有影响研究结果的科学性。如果客户后续实验要避免胎牛血清的干扰，客户可以在培养完成后做饥饿实验，用以排除血清的干扰；以目前的技术水平限制来说的话，不管是基质胶也好，胎牛血清也好，目前无法做到不依赖外源动物源性的物质。

3、问：这个怎么看这个类器官是否长好了，如果只是覆盖了材料的表层，这个就还不算类器官

  答：这个目前不能直接通过倒置显微镜肉眼来看来确认，只能依靠预实验，进行1-3周培养，一般建议2-3周即可。我们可以给客户提供一个关于在我们团队长成的一个时间和状态，给客户做一个参考。基于SBP进行类器官培养，肿瘤组织并不是只覆盖了材料的表层，而是充满材料的腔隙，呈现3D生长。

4、问：关于册子上的配图，后面的肿瘤，客户认为这个不属于类器官，类器官需要包含多种细胞，咱们这个仅包含一种肿瘤细胞，严格来说只算是肿瘤细胞的3D培养

  答：指体外三维（3D）培养形成的具有一定空间结构的组织类似物。尽管类器官并不是真正意义上的人体器官，但能在结构和功能上模拟真实器官，能够最大程度地模拟体内组织结构及功能。基于SBP进行类器官培养，获得具有一定空间结构的组织类似物如肿瘤等。

目前的肿瘤类器官，如就基于基质胶的3D肿瘤类器官，多是仅包含一种肿瘤细胞，目前加入血管和免疫细胞也是研究阶段，你可以后续加入多种细胞进行培养完善。您可以认为这个是3D培养没有错，但是我们可以拿单一的细胞系就完成3D培养，这个就是最大的进步，目前据我们了解很多做3D培养不管使用什么方法后续效果都不好，很多细胞本身做3D培养就很难成功，使用我们的产品做肿瘤细胞系的3D培养，甚至可以在材料微孔中形成类似肿瘤组织结构的腺腔，而且能表现出对材料的侵袭，已经远超普通的3D培养了

5、问：我们材料的孔径有多大？

  答：我们的材料凝胶包被后孔径差不多在50 μm作用，凝胶包被被消化后天然生物材料孔径约300-800 μm。

6、问：咱们的这个离心管底部要是有气泡应该怎么排出，是否需要离心？气泡如果排不出，中间肯定不长。

  答：我们的材料是多微孔结构，加完培养液之后，形成气泡会沿着微孔结构自动挤压排出，离心管底部气泡不影响细胞增殖形成类器官。

7、问：使用SPB复合材料支架接种细胞有何要求？

  答：接种细胞要指数生长期的细胞最好，接种细胞数量2-3×10⁶个细胞。