DAPI染色液

产品描述：

DAPI（4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐，4,6-联脒-2-苯基吲哚）

英文名：4,6-diamidino-2-phenylindole，DAPI dihydrochloride，

2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride

CAS：28718-90-3

分子式：C₁₆H₁₅N₅·2HCl 

分子量：350.25

DAPI是一种能够与DNA中大部分A、T碱基相互结合的荧光染料，可以穿透完整的细胞膜，与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比 DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍，是非常优秀的DNA染料。荧光显微镜下可以看到细胞核呈显蓝色荧光，细胞标记的效率高（几乎为100 %）。DAPI常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，DAPI染色也常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到细胞核的形态变化（A、正常的细胞核：核形完整，染色质均匀。 B、染色质固缩，向外周聚集，形成周边化。C、染色质进一步固缩，形成很多颗粒物质。D、细胞核破裂形成碎片，核解体）。DAPI的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm；当DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为360nm，最大发射波长为460nm。DAPI的发射光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red 染剂（红色荧光染剂）的发射波长仅有少部分重叠，可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。本产品为DAPI PBS溶液，纯度≥90%，为即用型工作液，可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。

使用说明：

1、固定细胞或组织切片：经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI染色；

2、贴壁细胞：加入少量DAPI染色液，覆盖住样品即可。吸除DAPI染色液用TBST、PBS或生理盐水洗涤2～3次，每次3～5分钟；

3、悬浮细胞：至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温染色5～10分钟；

4、移植的细胞：在细胞移植前，将DAPI以一定的浓度加入培养基中，与细胞共同孵育过夜，用PBS缓冲液漂洗至少6次以洗掉未结合的DAPI，再用酶消化后离心收集细胞，加入DMEM培养基制成细胞悬液备用；

5、置于荧光显微镜下观察，激发波长360～400nm。

产品特点：

1. DAPI染色液可以用于活细胞和固定细胞的染色；
2. 本品为即用型工作液，可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色；

温馨提示：

1、DAPI被认为具有致癌性，操作时应戴手套，并避免交叉污染；

2、本产品需避光，并尽量避免反复冻融；

3、荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测；

4、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂；

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存：-20℃避光保存，2年有效（分装后4℃避光可保存3～6个月）